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島津液相質譜聯(lián)用儀的標準操作規(guī)程

更新時間:2024-12-19      點擊次數(shù):436
島津液相質譜聯(lián)用儀(LC-MS,LiquidChromatography-MassSpectrometry)是一種結合液相色譜和質譜技術的分析儀器,廣泛應用于化學、生物學、藥學等領域,特別是在復雜樣品的定性和定量分析中。為了確保儀器的正常運行和分析結果的準確性,使用島津液相質譜聯(lián)用儀時需要遵循嚴格的標準操作規(guī)程(SOP)。  
以下是島津液相質譜聯(lián)用儀的標準操作規(guī)程(SOP)框架,適用于大多數(shù)型號,如LCMS-8030,LCMS-8050,NexeraX2LC等。  
1.設備準備  
1.1檢查儀器外觀  
檢查儀器是否完好無損,外部無明顯的損壞。  
確保儀器放置平穩(wěn),環(huán)境通風良好,避免灰塵和震動干擾。  
1.2檢查電源  
確保儀器的電源連接正常,檢查電壓是否符合要求(通常為AC100-240V)。  
啟動前確認液相色譜系統(tǒng)和質譜儀的電源開關已打開。  
1.3確認氣源連接  
氣源檢查:檢查氣源(例如氮氣、氦氣、氫氣)的供應情況和氣壓是否正常。  
確保氣體管道和連接接口無泄漏。  
氮氣壓力:常規(guī)質譜儀通常需要大于50psi的氮氣壓力(視型號而定)。  
氦氣壓力:用于質譜分析中某些離子的碰撞池。  
1.4檢查溶劑和樣品準備  
溶劑準備:確保所用溶劑(如水、甲醇、乙腈等)純凈且經過過濾。  
樣品準備:確保樣品的濃度、溶劑與注射器適配,避免出現(xiàn)顆粒或沉淀。  
2.液相色譜系統(tǒng)的操作  
2.1設置樣品管  
將樣品注射器或自動進樣器裝載到色譜系統(tǒng)中,確保樣品管位置正確,連接緊密。  
2.2配置色譜柱  
選擇合適的色譜柱,根據(jù)分析目標選擇反相、正相或其他特殊柱(如C18柱、HILIC柱等)。  
確保色譜柱安裝正確,方向不反,連接緊固。  
2.3設置流動相和流速  
根據(jù)分析需要配置流動相,如水/有機溶劑混合液,保證溶劑無氣泡。  
設置流速和柱溫:一般流速為0.2–1.0mL/min,柱溫為30–50°C。  
2.4預處理液相系統(tǒng)  
啟動液相色譜系統(tǒng)前,需要進行系統(tǒng)預處理,例如清洗管道,去除溶劑氣泡,確保流動相完全進入色譜柱。  
啟動前通過系統(tǒng)進行溶劑沖洗,確保色譜系統(tǒng)內無污染。  
3.質譜儀的操作  
3.1開機前準備  
打開質譜儀并等待預熱。儀器啟動時,通常需要5–10分鐘進行自檢和初始化。  
確保質譜分析區(qū)域溫度在正常范圍內,氣體供應正常。  
3.2設置質譜條件  
選擇離子源:常用的離子源有電噴霧源(ESI)、化學電離源(CI)等。根據(jù)樣品性質選擇合適的離子源。  
設定分析模式:根據(jù)分析需求選擇正離子模式或負離子模式,以及全掃描模式(FullScan)、選擇離子監(jiān)測模式(SIM)或多反應監(jiān)測模式(MRM)等。  
設置質譜分析參數(shù):如離子源的電壓、溫度、碰撞能量、分辨率等。  
ESI源的設定通常包括:噴霧電壓、溶液流速、輔助氣流等。  
3.3調整掃描范圍  
根據(jù)樣品的質譜特性設置適當?shù)膾呙璺秶ǔ?00–1000Da。  
確定質荷比(m/z)范圍,以保證所有目標化合物的離子信號都能被檢測。  
3.4離子源校準  
定期對離子源進行校準,確保其性能穩(wěn)定。通常通過使用質譜校準液或標準物質來進行校準。  
4.操作步驟  
4.1啟動系統(tǒng)并進行儀器自檢  
在軟件中選擇儀器操作,啟動質譜儀和液相色譜系統(tǒng)的自檢功能。系統(tǒng)會自動檢查各項參數(shù)并進行系統(tǒng)調節(jié)。  
確保自檢無故障,確認質譜儀與液相色譜系統(tǒng)正常通信。  
4.2樣品分析  
通過樣品進樣器將樣品注入液相色譜系統(tǒng)。液相色譜系統(tǒng)開始分離化合物。  
在質譜儀中,分析分離后的化合物,實時獲取質譜數(shù)據(jù)。  
4.3數(shù)據(jù)采集與處理  
啟動數(shù)據(jù)采集,實時監(jiān)測儀器狀態(tài),確保質譜信號穩(wěn)定。  
在分析過程中,根據(jù)需求調整色譜或質譜的相關參數(shù),例如流速、掃描范圍、碰撞能量等。  
使用島津的分析軟件(如LabSolutionsLCMS)進行數(shù)據(jù)處理和結果分析。  
5.儀器維護與日常檢查  
5.1清洗和保養(yǎng)  
定期清洗色譜柱和進樣器,以確保無雜質堆積。  
定期檢查儀器的流動相供應系統(tǒng),避免溶劑污染。  
質譜系統(tǒng)應定期進行離子源清潔,尤其是噴嘴和離子源區(qū)域。  
5.2檢查氣源與電源  
定期檢查氮氣、氦氣等氣源壓力是否符合要求,確保供氣穩(wěn)定。  
確保電源正常,電壓無波動,避免電力不穩(wěn)影響儀器運行。  
5.3校準和性能驗證  
定期對儀器進行校準,確保系統(tǒng)的分辨率、靈敏度和精確度。通常使用質譜標準物質或校準液進行驗證。  
進行質譜質量控制,如噪聲、靈敏度、重復性等指標的檢查。  
6.安全注意事項  
操作人員需佩戴適當?shù)姆雷o設備,如手套和護目鏡。  
嚴格遵守實驗室安全規(guī)程,特別是在操作易揮發(fā)溶劑和高壓氣體時。  
保持工作區(qū)域的清潔,避免樣品交叉污染。  
7.結束操作與關機  
7.1關機順序  
先關閉質譜儀,再關閉液相色譜儀。  
按照設備手冊正確關閉各個部分,尤其要確保氣源關閉。  
7.2數(shù)據(jù)存儲與備份  
在結束前,確保數(shù)據(jù)已保存并備份,避免數(shù)據(jù)丟失。  
通過遵循上述標準操作規(guī)程(SOP),可以確保島津液相質譜聯(lián)用儀的正常運行,提高分析結果的準確性和儀器的使用壽命。
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